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【复盘】Comet Assay Kits彗星检测试剂盒常见问题

发布者:亚博网页版    发布时间:2021-09-08     
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彗星实验(Comet assay)也被称为单细胞凝胶电泳实验(Single cell gel electrophoresis,SCGE),是一种在单细胞水平上检测DNA损伤的技术。

 

彗星分析专用玻片

货号名称规格说明
STA-352Comet Assay Slides, 3-Well5 slides

彗星分析专用玻片.png

STA-35325 slides
STA-353-55 x 25 slides
STA-356Comet Assay Slides, 96-Well1 slide

彗星分析专用玻片.png

STA-356-55 slides


彗星分析试剂盒

货号名称规格说明
STA-350Comet Assay Kits, 3-Well15 assays

彗星分析专用玻片.png

STA-35175 assays
STA-351-55 x 75 assays
STA-355Comet Assay Kits, 96-Well96 assays
STA-355-55 x 96 assays


常见问题解析:

 

Q1:彗星玻片是否可以单独提供?

A1:可以的。有对应单独玻片的产品:cat#STA-352  3孔/玻片,共5片;cat#STA-353 3孔/玻片,共25片;cat#STA-356 96孔/玻片,共1片

Q2:彗星玻片可以重复使用吗?

A2:不能。彗星玻片表面经过了特殊处理,一旦整个玻片经历了变性,电泳和洗涤的操作步骤,就不能再重复使用了。

Q3:可以用常规载玻片代替试剂盒中的彗星玻片吗?

A3:不能,彗星玻片经过化学预处理,以增加附着力。如果采用常规载玻片的话,您的细胞/琼脂糖液滴将无法停留在载玻片上。

Q4:彗星玻片有多厚?

A4:1.0mm(底层厚度,不包含蓝色层)

Q5:该彗星分析试剂盒适合用哪种电泳仪?

A4:该彗星分析试剂盒可用于任何水平电泳槽,不限于任何特定型号,但不能使垂直电泳仪。

Q6:该试剂盒是否适用于植物组织样本?

A7:可以用于植物组织。彗星试剂盒用于检测单细胞悬液的DNA损伤,与任何细胞类型兼容,只要将样本制备为单细胞悬液即可。

Q7:用试剂盒的Vista Green染料染色后,玻片可以保存多久?

A7:用Vista Green染色后的玻片可在4℃的黑暗环境中保存3个月,荧光也不褪色。 干燥且未沾有Vista Green的载玻片可以保存一年。

Q8:说明书中配置电泳液的过程中没有提到是否需要灭菌?

A8:不需要灭菌。如果配置的过程中发现有不溶物,可以进行过滤处理。

Q9:什么是好的阳性对照?

A9:用20uM依托泊苷(etoposide)培养细胞4小时,作为彗星实验的阳性对照。

Q10:是否有化合物诱导DNA损伤的彗星分析数据供参考呢?

A10:与ELISA不同,彗星实验不提供对照,因为任何彗星实验结果都将根据实验条件的不同而变化。例如,如果电泳条件不同,则包含相同数量 DNA 损伤的细胞的尾巴大小可能会不同。所以,与我们的结果或其他研究人员的结果进行比较将毫无意义,因为两者之间的条件永远不会相同。如果您有兴趣测试化合物对DNA损伤的影响,建议保持所有实验条件一致,并使用相同的运行时间和软件进行分析。

Q11:如何防止琼脂糖凝胶从载玻片上脱落?

A11:彗星玻片经过化学处理,表面带有粘性,可吸附琼脂糖。琼脂糖从玻片上脱落,主要是因为琼脂糖-细胞混合液添加到玻片孔上时,未完全覆盖。必须保证琼脂糖凝胶完全覆盖在孔上,另外玻片始终保持水平状态也很重要。

 

2020~2021最新发表文章:

1.Maksimova, V. et al. (2021). HeLa TI cell-based assay as a new approach to screen for chemicals able to reactivate the expression of epigenetically silenced genes.PLoS One.16(6):e0252504. doi: 10.1371/journal.pone.0252504.

2.Chong, S.J.F. et al. (2020). Serine-70 phosphorylated Bcl-2 prevents oxidative stress-induced DNA damage by modulating the mitochondrial redox metabolism.Nucleic Acids Res. doi: 10.1093/nar/gkaa1110.

3.Prendergast, L. et al. (2020). Histone chaperone FACT is essential to overcome replication stress in mammalian cells.Oncogene. doi: 10.1038/s41388-020-1346-9.

4.Kong, L.R. et al. (2020). Targeting codon 158 p53-mutant cancers via the induction of p53 acetylation.Nat Commun.11(1):2086. doi: 10.1038/s41467-020-15608-y.

5.Kisin, E. R. et al. (2020). Enhanced morphological transformation of human lung epithelial cells by continuous exposure to cellulose nanocrystals.Chemosphere. doi: 10.1016/j.chemosphere.2020.126170.

 

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