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CD系列抗体专题1——荧光标记CD3抗体

发布者:亚博网页版    发布时间:2021-09-01     
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CD3是一种蛋白质复合物,通常在所有成熟T细胞的表面表达。它的主要功能是作为T细胞共同受体,促进细胞毒性T细胞(CD8+T细胞)和辅助T细胞(CD4+ T细胞)的活化,并最终帮助形成获得性免疫反应。作为T细胞活化的一个组成部分,CD3已成为药物开发的一个有潜力的指标,针对CD3开发的治疗性单克隆抗体 (mAb),可作为一种自身免疫疾病和移植排斥的免疫疗法,其中最著名的就是奥昔组单抗,它被开发用于治疗1型糖尿病和自身免疫性疾病。

 

CD3蛋白质复合物.png

 

在流式细胞分析中,人CD3通常被用作将T细胞与其他淋巴细胞区分开来的谱系特异性标记物。CD3 对T细胞的特异性与其在T细胞发育的所有阶段均可出现结合的特性,使其成为检测健康T细胞和T细胞癌(例如白血病、淋巴瘤)的理想标志物。在免疫组织化学研究中,CD3是组织切片中T细胞的免疫组化标志物。

 

CD3介绍

目录价值
同义词T3、OKT3、Leu4
细胞定位细胞膜
细胞表达T细胞、双阴性胸腺细胞(例如 CD4- 和CD8-)、γ/δ T细胞、NKT细胞、巨噬细胞
受体类型免疫球蛋白 (IgG) 超家族
配体与 MHC 结合的肽抗原
相关信号通路T细胞受体表达和T细胞信号通路
功能T细胞标志物、T细胞受体表达和T细胞信号传导

 

CD3 蛋白复合物

由于其胞质尾短,T 细胞受体 (TCR) 缺乏在肽主要组织相容性复合物 (pMHC) I 类或 II 类分子的抗原识别时发出信号的能力。为了激活启动免疫细胞激活的必要下游通路,TCR 需要由称为 CD3 蛋白的信号分子复合物启动细胞内信号。

 

CD3结构

CD3 蛋白复合物由四个恒定链(CD3ε、CD3δ、CD3γ 和 CD3ζ)组成,它们组成一个N端细胞外域和一个跨膜结构域,并且在所有T细胞中都是相同的。N端细胞外域由两个异源二聚体结构域CD3εγ和CD3εδ 组成,跨膜结构域由单个同源二聚体CDζζ组成。

 

CD3及其在疾病中的作用

编码 CD3 亚基的基因突变可导致严重联合免疫缺陷 (SCID),这是一种罕见的常染色体隐性遗传疾病,其特征是T和B淋巴细胞分化和功能严重缺陷。CD3亚基的缺陷与以下因素有关:

CD3δ和CD3ε 缺失与严重的αβ细胞淋巴细胞减少相关,导致T- B+ NK+ SCID 表型。

CD3ε 缺失导致T细胞发育完全阻断。

CD3γ缺失导致部分T细胞免疫缺陷。

CD3ζ缺失与免疫缺陷 25和系统性红斑狼疮 (SLE) 相关。


组成CD3蛋白复合物多肽链CD3ε、CD3δ、CD3γ 和 CD3ζ

CD3链相对分子量糖基化ITAM 的数量基因
CD3ε20kDa非糖基化多肽链1CD3E(人染色体11带q23)
CD3δ20kDa糖基化多肽链1CD3D(人染色体11带q23)
CD3γ25-28kDa糖基化多肽链1CD3G(人染色体11带q23)
CD3ζ17 kDa非糖基化多肽链3CD247(人染色体1带q22-q25)

 

CD3 抗体

单克隆CD3抗体可结合CD3/T细胞抗原受体复合物的ε链,经常用于流式细胞和免疫荧光应用,以识别表达CD3的免疫细胞亚群。已知表达CD3表面标志物的细胞包括约60-85% 的正常外周血淋巴细胞、约65-85%的胸腺细胞以及小脑和胃壁细胞的浦肯野细胞。

在这里,我们给大家提供了各类染料标记的CD3抗体,这些抗体通过亲和层析纯化,并在最佳条件下与各种荧光团结合,首先是我们的iFluor系列染料

iFluor染料-明亮、光稳定的染料,适用于流式细胞术 (FACS)、荧光成像和体内成像应用。

 

iFluor 染料标记的CD3抗体

下表列出了可用于流式细胞术 (FACS) 和荧光成像的iFluor染料标记的人CD3抗体的荧光特性。用iFluor染料制成的偶联物具有出色的亮度和光稳定性,优于 Alexa Fluor 偶联物和。

iFluor 染料标记的CD3抗体

荧光
标记
货号Ex
(nm)
Em
(nm)
εΦCF 260
nm
CF 280
nm
iFluor3501003001034444820,0000.950.830.23
iFluor4051003002040242537,0000.910.480.77
iFluor4301003003043349540,0000.780.680.3
iFluor4501003004045150240,0000.820.450.27
iFluor4881003005049151675,0000.90.210.11
iFluor5141003006052755480,0000.830.250.11
iFluor5321003007054356390,0000.680.260.16
iFluor54610030080541557100,0000.670.250.15
iFluor55510030090556569100,0000.640.230.14
iFluor560100300A0559571130,0000.570.0480.069

 

Note:

1.Ε=最大吸收波长处的摩尔消光系数(单位 = cm -1 M -1)(下同)。

2.Φ =水性缓冲液(pH 7.2)中的荧光量子产率(下同)。

3.260 nm处的CF是用于消除染料对260 nm处吸光度的影响的校正因子(用于寡核苷酸和核酸标记)(下同)。

4.280nm处的CF是用于消除染料对280 nm处吸光度的贡献的校正因子(用于肽和蛋白质标记)(下同)。

上述每一种抗体都可以提供HIT3b,SK7,UCHT1,HIT3a,OKT-3这几种克隆号,每种克隆号对应的

 

同种型和应用类型如下:

免疫原类型物种反应性宿主,同种型克隆号应用类型
识别 CD3ε 链单克隆小鼠,IgG1HIT3bFC、IHC-F、IF
识别 CD3ε 链单克隆小鼠,IgG1,κSK7FC、IHC
识别 CD3ε 链单克隆小鼠,IgG1,κUCHT1FC、FN、IHC-F、ICC、IP、WB
识别 CD3ε 链单克隆小鼠,IgG2a,κHIT3aFC、FN、IHC-F、IP
识别 CD3ε 链单克隆小鼠,IgG2a,κOKT-3FC

应用缩写说明FC = 流式细胞术;FN = 功能测定;IF = 免疫荧光;IHC = 免疫组织化学;IHC-F = 免疫组织化学(冷冻);ICC = 免疫细胞化学;WB = 蛋白质印迹;IP = 免疫沉淀。

 

除了iFluor 荧光团外,我们还提供以下4大类荧光标记的CD3抗体,他们分别是:

mFluor染料:明亮、光稳定的染料,针对流式细胞术 (FACS) 应用进行了优化。

荧光团Ex (nm)Em (nm)εΦCF 260 nmCF 280 nm
mFluor UV37535438835,0000.940.0990.138
mFluor Violet 45040644525,0000.920.3380.078
mFluor UV46036245615,0000.860.350.134
mFluor Violet 50042649735,0000.810.7690.365
mFluor Violet 51040950430,0000.860.4640.366
mFluor Violet 54040053215,0000.641.3920.529
mFluor Blue 570552564120,0000.080.2280.179
mFluor Green 62052161750,0000.060.8950.569
mFluor Yellow 630546625110,0000.010.2830.413
mFluor Red 700657694250,0000.0290.1350.127

 

Alexa Fluor染料:适用于流式细胞术 (FACS) 和荧光成像应用。

荧光团Ex (nm)Em (nm)εΦCF 280 nm
Alexa Fluor 35034344119,000N/D0.19
Alexa Fluor 48849952073,0000.920.11
Alexa Fluor 555553568155,0000.10.08
Alexa Fluor 59459061892,0000.660.56
Alexa Fluor 647650671270,0000.330.03
Alexa Fluor 680681704183,0000.360.05
Alexa Fluor 700696719205,0000.250.07
Alexa Fluor 750752776290,0000.120.04

 

经典染料:适用于流式细胞术 (FACS) 和荧光成像应用。

荧光团Ex (nm)Em (nm)εΦCF 280 nm
Pacific Blue40445546,0000.780.2
FITC49151673,0000.790.254
Pacific Orange40055125,000N/D0.6
TRITC54457085,0000.10.34

 

藻胆蛋白和串联染料:用于流式细胞术 (FACS) 和多参数分析的高亮度染料。

荧光团Ex (nm)Em (nm)ε激光 (nm)
PE5665741,960,000488 nm, 532 nm, 561-568 nm
PE-Texas Red5676151,960,000488 nm, 532 nm, 561-568 nm
PE-Alexa Fluor 6105676271,960,000488 nm, 532 nm, 561-568 nm
PE-Cy55656661,960,000488 nm, 532 nm, 561-568 nm
PE-iFluor 6475696661,960,000488 nm, 532 nm, 561-568 nm
PE-Alexa Fluor 7005667211,960,000488 nm, 532 nm, 561-568 nm
PE-Cy75667781,960,000488 nm, 532 nm, 561-568 nm
PE-iFluor 7505667781,960,000488 nm, 532 nm, 561-568 nm
APC651660700,000633-647 nm
APC-iFluor 700651710700,000633-647 nm

 

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